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核酸提取纯化方法,易错点及优化

来源:环光参考网

核酸提取是很多生物实验的核心步骤,但是相信很多实验者都曾经遇到过纯化过程中出现问题的情况。本文总结了一些核酸提取和纯化中的易错点及优化方法,供大家参考。

一、样品处理

样品处理是核酸提取和纯化的关键步骤之一,处理不当会影响到提取和纯化的效果。比如,细胞溶解不彻底、孵育时间不足、悬液过多等均会影响到纯化后的核酸质量。

二、裂解方法

不同的样品需要采用不同的裂解方法。比如,对于细胞壁结构较为坚硬的细菌可以采用冻融法或超声波法进行裂解,而对于含有较多脂质的样品可以采用有机溶剂法。

三、DNA纯化方法

目前比较常用的DNA纯化方法有离心柱法、硅胶小柱法和磁珠法等。不同的纯化方法在提取效率、纯化效果、操作简便程度等方面都会有所不同,需要根据实际情况选择合适的方法。

四、RNA纯化方法

RNA纯化相对于DNA纯化来说更加复杂。此外,RNA容易受到核酸酶的影响,需要在取材和样品处理过程中做好保护措施。目前比较常用的RNA纯化方法有离心柱法、硅胶小柱法和磁珠法等,需要根据实际情况选择合适的方法。

五、操作技巧

在样品处理和纯化过程中,注意消毒、避免污染以及注意不同试剂的搭配和操作顺序。此外,建议在操作过程中记录一些关键步骤以备不时之需。

核酸提取和纯化是非常重要的基础实验步骤,仔细看待其中每一个步骤,巧妙解决易错点,必将为后续的实验奠定良好的基础。

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